Фенілгалактазід CAS: 2818-58-8

Уплыў на актыўнасць ферментаў: Фенілгалактазід звычайна выкарыстоўваецца для вымярэння актыўнасці фермента β-галактозидазы.Калі фенилгалактозид гидролизуется β-галактозидазой, ён вызваляе п-нитрофенол.Назапашванне п-нітрафенолу можна колькасна вымераць, што дазваляе зразумець актыўнасць β-галактозідазы.Гэты эфект выкарыстоўваецца ў такіх праграмах, як ферментныя аналізы і сістэмы скрынінга.

Аналіз экспрэсіі генаў: фенілгалактазід часта выкарыстоўваецца ў якасці субстрата ў малекулярна-біялагічных эксперыментах для вывучэння экспрэсіі генаў.Ген lacZ, які кадуе β-галактозидазу, звычайна зліты з рэгулятарнымі паслядоўнасцямі іншых цікавых генаў.Экспрэсія гена lacZ і гідроліз фенилгалактозида β-галактозидазой могуць паказваць на карціну экспрэсіі і ўзровень гена-мішэні, які вывучаецца.

Сістэмы скрынінга: Фенілгалактазід з'яўляецца важным кампанентам сістэм скрынінга, якія выкарыстоўваюць актыўнасць β-галактозидазы.Адным з шырока вядомых прыкладаў з'яўляецца сіне-белы метад скрынінга, які выкарыстоўваецца для ідэнтыфікацыі рэкамбінантных або трансфармаваных клетак у малекулярна-біялагічных эксперыментах.Калоніі, якія паспяхова засвоілі рэкамбінантныя ДНК або падвергліся генетычнай рэкамбінацыі, будуць экспрэсаваць β-галактозидазу, што прывядзе да гідролізу фенілгалактазіда і адукацыі сіняга колеру.

Ачыстка бялку: у некаторых выпадках фенилгалактозид можна выкарыстоўваць у якасці ліганда для аффинной храматаграфіі для ачысткі бялкоў, якія спецыфічна звязваюцца з β-галактозидазой або актывуюцца ёю.Цікавы бялок можа мець афінную пазнаку або злітую пазнаку, якая змяшчае дамен, які звязвае β-галактозидазу.Прапусціўшы бялковую сумесь праз калонку з иммобилизованным фенилгалактозидом, жаданы бялок можа быць выбарачна захаваны і пасля элюирован.