Фенілгалактазід CAS:2818-58-8

Уплыў на актыўнасць ферментаў: фенілгалактазід звычайна выкарыстоўваецца для вымярэння актыўнасці фермента β-галактазідазы. Калі фенілгалактазід гідралізуецца β-галактазідазай, ён вызваляе п-нітрафенол. Назапашванне п-нітрафенолу можна колькасна вымераць, што дае ўяўленне аб актыўнасці β-галактазідазы. Гэты эфект выкарыстоўваецца ў такіх прымяненнях, як ферментныя аналізы і сістэмы скрынінга.

Аналіз экспрэсіі генаў: Фенілгалактазід часта выкарыстоўваецца ў якасці субстрата ў эксперыментах па малекулярнай біялогіі для вывучэння экспрэсіі генаў. Ген lacZ, які кадуе β-галактазідазу, звычайна зліваецца з рэгуляторнымі паслядоўнасцямі іншых генаў, якія цікавяць. Экспрэсія гена lacZ і гідроліз фенілгалактазіду β-галактазідазай могуць паказваць на характар ​​экспрэсіі і ўзровень мэтавага гена, які вывучаецца.

Сістэмы скрынінгу: Фенілгалактазід з'яўляецца важным кампанентам сістэм скрынінгу, якія выкарыстоўваюць актыўнасць β-галактазідазы. Адным з шырока вядомых прыкладаў з'яўляецца метад сіне-белага скрынінгу, які выкарыстоўваецца для ідэнтыфікацыі рэкамбінантных або трансфармаваных клетак у эксперыментах па малекулярнай біялогіі. Калоніі, якія паспяхова засвоілі рэкамбінантную ДНК або прайшлі генетычную рэкамбінацыю, будуць экспрэсаваць β-галактазідазу, што прывядзе да гідролізу фенілгалактазіду і ўтварэння сіняга колеру.

Ачыстка бялку: У некаторых выпадках фенілгалактазід можа быць выкарыстаны ў якасці ліганда для афіннай храматаграфіі для ачысткі бялкоў, якія спецыфічна звязваюцца з β-галактазідазай або актывуюцца ёю. Цікаві бялок можа мець афінную метку або метку зліцця, якая змяшчае β-галактазідазвязальны дамен. Прапускаючы бялковую сумесь праз калонку з імабілізаваным фенілгалактазідам, патрэбны бялок можа быць селектыўна захаваны і пасля элюяваны.